快速鼠尾鑒別試劑盒（PCR系列）

產(chǎn)品介紹

1. 產(chǎn)品描述：

信勵致和®快速鼠尾鑒別試劑盒配備了整套的DNA粗提取及PCR擴增體系，可直接快速地對小鼠組織（如鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等）樣本進行PCR擴增，無需勻漿、破碎、過夜消化、酚氯仿抽提、DNA沉淀或柱式純化等操作，操作更加簡單快速。本試劑盒適用于10 kb以內(nèi)目的片段擴增及4對引物以內(nèi)的多重PCR反應，可用于快速基因型鑒定、小鼠基因分型等。

2. 產(chǎn)品特點：

（1）使用方便，試劑盒中提供的PCR擴增體系含有染料，擴增后可直接用于電泳檢測。

（2）兼容性好，試劑盒兼容4對引物以內(nèi)的多重PCR反應，大大加快實驗進程。

快速鼠尾鑒別試劑盒（PCR系列）

使用說明

1. 產(chǎn)品組分：

2. 儲運條件：

2×鼠尾直擴PCR預混液（含染料）于-25~-15℃保存，其余組分2~8℃保存。干冰運輸。

3. 注意事項：

（1）使用組織裂解液時，需將組織全部浸沒至裂解液中以保證優(yōu)良的消化效果。

（2）PCR預混液避免反復凍融。

相關數(shù)據(jù)

1. 裂解后直擴測試：

使用本品對樣本進行裂解和PCR擴增檢測，實驗設置三組平行，結果如上圖所示，擴增條帶清晰、明亮、單一，實驗數(shù)據(jù)有力地證明了本品中的組織裂解液對下游實驗無不良影響，且2×鼠尾直擴PCR預混液特異性好。

2. 多重PCR直擴測試：

使用本品對樣本進行多重PCR擴增檢測，實驗設置三組平行，結果如上圖所示，擴增條帶清晰、明亮、無雜帶，實驗數(shù)據(jù)有力地證明了本品中的組織裂解液對下游實驗無不良影響，且2×鼠尾直擴PCR預混液擴增效率高，特異性好，兼容性廣。

常見問題

1. 擴增產(chǎn)量低或者無法擴增？

原因分析：出現(xiàn)產(chǎn)物量低或者擴增無條帶一般有以下原因：PCR 反應中加入的裂解液過量；裂解液中混入了PCR抑制物；模板加入量不適合；PCR 循環(huán)數(shù)不夠；循環(huán)反應退火溫度設置太高；PCR 引物錯配嚴重。

解決方案：減少裂解液用量；或將裂解產(chǎn)物稀釋10倍后再進行PCR擴增；或增大PCR反應體系；裂解產(chǎn)物用量不應超過PCR反應總體積的1/10；增加PCR循環(huán)數(shù)以獲得更好的擴增效果；降低退火溫度（每次降低3℃）；重新設計引物并在BLAST檢測引物的特異性。

2. 非特異性擴增？

原因分析：PCR退火溫度太低；循環(huán)數(shù)太多；或引物濃度/模板濃度太高；未在冰上配制PCR反應體系；或配制完成后放置時間太久；PCR引物錯配。

解決方案：升高PCR退火溫度；減少PCR循環(huán)數(shù)；降低引物濃度或模板濃度；重新設計PCR引物。